WP10 : Ressources et développements en mutagenèse et transgénèse


Objectifs

Partager nos connaissances et améliorer l’utilisation des nouvelles techniques en mutagenèse et transgénèse :

  • améliorer les designs
  • constructions
  • technos ZFN Tale Nucleases
  • transposons
  • outils cre, banque de données intéressantes dans nos domaines

Conduire une veille scientifique sur les ressources d’intérêt en mutagenèse et transgénèse et retour d’expérience sur leur utilisation.

Bilan des actions passées

Première réunion 8 juin 2012

  • modification par nucléases : les ZFNs et les Tale Nucleases
  • échanges sur les tests en cours dans les différents centres
  • partage de Laurent Tesson (Nantes) sur leur expérience chez le rat

Table ronde technologique : Tale Nucleases

Actions futures

1 réunion par quadrimestre/semestre
Modification par nucléases : les ZFNs et les Tale Nucleases

  • Les méthodes de ciblage, détection des mutations (souvent ponctuelles, donc délicates à mettre en évidence)
  • La stratégie d'utilisation / efficacité des Tale Nucleases ou ZFNs.
  • Systèmes pas toujours efficaces. Etudes in vitro (embryons injectés non ré-implantés). Tests en cellules de la même espèce : comment les effectuer sans y perdre du temps tout en ayant une réponse intéressante
  • Comment améliorer l'efficacité desTale Nucleases /ZFNs? Concentration d'utilisation? Site d'injection (noyau, cytoplasme)? Méthode d'injection? Age de l'embryon?
  • Quelles demandes faire auprès des fournisseurs? Plusieurs Tale Nucleases / gène ciblé?
  • Préparation des mRNA? Tests de qualité? Tests d'efficacité in vitro? (simples?)
  • Problème de la valorisation des animaux obtenus (brevets?) par l'utilisation des TALENs ou ZFNs. Ou des animaux obtenus par d’autres méthodes.
  • Conservation des mutants ainsi générés : cryobanque. Mais remettre une lignée en vie à partir d'embryons congelés est très long, couteux, le « client » ne veut pas s'y investir…

Coordination

Guillaume Pavlovic
ICS, Illkirch